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title: 抗体精製の基本：効果的な手法とポイント
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 12月 22, 2023

# 抗体精製の基本：効果的な手法とポイント

![Picture of Central Link株式会社](https://corp.kentainavi.com/hs-fs/hubfs/Central%20Link%20LOGO.png?width=50&name=Central%20Link%20LOGO.png) By   Central Link株式会社  ·   1 minute read

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抗体の作製をするためには、目的の抗体を産生させる・選択するだけでなく、抗体以外の不要な物質を取り除き、精製することも重要です。このブログでは、基本的な抗体の精製方法について解説します。

 

### 抗体精製の基本スキーム

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#### 1. 清澄化（Clarification）

- **目的:** 原料から抗体以外のタンパク質や不純物を除去する。
- **手法:** 遠心分離、フィルターによるろ過、塩析など。
- **注意:** 原料や抗体の種類によって調整が必要。

#### 2. 回収（Capture）

- **目的:** 目的の抗体を速やかに分離・濃縮する。
- **手法:** 主にアフィニティークロマトグラフィーが使用される。 
    - IgGの場合: Protein A/Gによるアフィニティークロマトグラフィー。
    - 他の抗体: 抗原アフィニティー精製など。

#### 3. 中間精製（Intermediate purification）

- **目的:** 回収ステップで一緒に回収された夾雑物を除去する。
- **手法:** イオン交換クロマトグラフィーが一般的。 
    - 等電点の情報がない場合、電気泳動で等電点を調べる。

#### 4. 最終精製（Polishing）

- **目的:** 残存する夾雑物を高性能カラムを用いて除去し、最終的な精製タンパク質を得る。
- **手法:** 高分離能なカラムを使用したゲルろ過クロマトグラフィーが一般的。

 

### 抗体精製で用いられる主なクロマトグラフィー手法

| 段階 | クロマトグラフィー手法 | 分離パラメーター | 特徴 |
| --- | --- | --- | --- |
| 回収 | Protein A/Gアフィニティークロマトグラフィー | 特異的親和性 | ワンステップで高い純度を得ることができる。 |
| 回収 | 抗体アフィニティークロマトグラフィー | 群特異的親和性 | 立体構造の類似性を認識して選択的分離が可能 |
| 回収 | Thiophilicアフィニティークロマトグラフィー | Thiophilic interaction | 抗体の種類により使用。疎水性相互作用クロマトグラフィーと同様な結合・溶出条件を使用 |
| 中間精製 | イオン交換クロマトグラフィー | 電荷 | 処理量、処理スピードが優れており、幅広いラインナップ |
| 最終精製 | ゲルろ過クロマトグラフィー | 分子サイズ（分子量） | 少ない処理量で高い精製効果。バッファーの交換も可能。 |

 

### 注意点と工夫

- **特異性の確認:** 各ステップで抗体の特異性を確認し、不要な成分の取り込みを最小限に抑える。
- **pHや塩濃度の調整:** 抗体の特性に合わせて適切な条件で処理。
- **成分の保護:** 抗体が不安定な場合、最適な条件で取り扱い、失活を避ける。

抗体精製は研究や医療の分野での応用において極めて重要であり、細心の注意が必要です。

 

Central Link株式会社では、原料採用が可能な様々な抗体を提案しており、主に体外診断薬を製造するお客様へ供給しています。  
抗体、ヒトや動物の生体試料、そのほかバイオ製品をお探しの際はお気軽にご相談ください。

 

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